跑完pcr后胶的电流多少，在做western blot时跑胶的电流为什么越来越低转膜的电流却越来

来源：整理时间：2023-02-07 05:40:22 编辑：亚灵电子网手机版

本文目录一览

1，在做western blot时跑胶的电流为什么越来越低转膜的电流却越来
2，chippcr后还需要跑胶后是怎么计算含量的
3，聚丙烯酰胺凝胶电泳的限制电流是多少谢谢
4，一条170bp和一条150bp的片段用多大的PAGE胶能分别出来电压和
5，pcr产物跑胶及数据处理问题

1，在做western blot时跑胶的电流为什么越来越低转膜的电流却越来

泡胶是电路是电泳槽小槽里的溶液，离子会经过胶渐渐进去下层，电路中离子减少，电阻增大，恒压的话就会电流降低。转膜时离子一直在，可能是温度的问题吧

在做western blot时跑胶的电流为什么越来越低转膜的电流却越来

2，chippcr后还需要跑胶后是怎么计算含量的

与普通的半定量pcr一样，根据条带亮度计算模板浓度。

chip就是指染色质免疫共沉淀，引物是一样的，反正我们实验室的是一样的

chippcr后还需要跑胶后是怎么计算含量的

3，聚丙烯酰胺凝胶电泳的限制电流是多少谢谢

看你跑的什么样品小分子蛋白还是用正常的最大120v的比较好大分子的如抗体跑180v 200v都是没问题的额其实定电流根定电压是一样的我许久没做了电流仿似跟你的Buffer离子强度有很大关系我建议最好不看电流，定电压如果电流过小你就应该考虑换液了

聚丙烯酰胺凝胶电泳的限制电流是多少谢谢

4，一条170bp和一条150bp的片段用多大的PAGE胶能分别出来电压和

我只跑过15%的PAGE，我觉得试一下5%~8%的吧，恒功率80W，跑上1.5~2小时。应该可以分出来。祝顺利

4.5%的PAGE 变性胶（加尿素），电泳槽高度至少200MM以上，方法同SSR 一般恒功率：40~80W 时间：2.5h~70min再看看别人怎么说的。

5，pcr产物跑胶及数据处理问题

如果按理论算的话，电泳条带亮度的不同代表起始浓度的不同，但是，你要知道，dna模板浓度达到一定程度之后，pcr产物亮度和起始模板浓度并不是完全成正比的。如10^7次方的模板和10^8次方的模板pcr的产物电泳亮度可能区别就不是很大，也就是扩增效率会随着模板浓度的变化而变化。所以我们要尽量使内参的条带亮度一致，以保证模板浓度一致，这样就尽量可以使各个不同模板之间在扩增目的基因时的扩增效率一致。

1 不可以啊2 须除去背景